thumb|200px|Struktura EcoRV w kompleksie z dwuniciowym DNA EcoRV (wym. [eko er pięć], ewentualnie [eko er fał]) – endonukleaza restrykcyjna typu II, wyizolowana po raz pierwszy ze szczepu pałeczki okrężnicy, będąca częścią bakteryjnego systemu modyfikacji restrykcyjnych.
W biologii molekularnej enzym EcoRV jest używany jako restrykcyjny. Przy cięciu DNA tworzy końce tępe (czyli nie końce lepkie). Rozpoznawana i cięta przez enzym jest palindromowa sekwencja 5'-GAT▼ATC-3' (nić komplementarna 3'-CTA▲TAG-5').
Struktura Struktura przestrzenna enzymu została rozwiązana metodami rentgenograficznymi w 1997 roku.
Struktura trzecio- i czwartorzędowa Rdzeń enzymu składa się z pięcioniciowych harmonijek beta flankowanych przez helisy alfa. Motyw ten jest konserwatywnie zachowany we wszystkich innych restrykcyjnych endonukleazach typu II. W strukturze można także wyróżnić N-końcową subdomenę dimeryczną, utworzoną przez krótka helisę α, dwuniciowe przeciwrównoległe harmonijki β i długą helisę α. Ta subdomena jest obecna wyłącznie w enzymach EcoRV i PvuII.