Gambusia holbrooki występuje w płytkich zbiornikach wody stojącej lub wolno płynącej, zazwyczaj w formie zarośniętych stawów, jezior i mokradeł. Preferuje zbiorniki bogate w ukorzenioną roślinność, wśród której znajduje schronienie. Optymalna temperatura życia zawiera się w granicach 31 °C do 35 °C, lecz gambuzja jest w stanie przystosować się do temperatury zarówno wyższej, jak i niższej. Dodatkowo Gambusia holbrooki wykazuje wysoką tolerancję na zmiany pH środowiska i zawartość związków chemicznych, które działają zabójczo na inne gatunki rybMulvey M., Keller G.P., Meffe G.K., 1994. Single and multiple locus genotypes and life-history responses of Gambusia holbrooki reared at two temperatures. Evolution. 46: 1810–1819.. Nie wykazano spadku populacji gambuzji wywołanego przez działania człowieka, a wręcz przeciwnie, zasięg występowania tej ryby znacząco wzrósł w wyniku poczynań człowieka. Gambuzja kropkowana nigdy nie była na liście gatunków zagrożonych, głównie ze względu na wysoką tolerancję i zdolność przetrwania w rozmaitych warunkachHernandez-Martich J.D., Smith M.H., 1997. Downstream gene flow and genetic structure of Gambusia holbrooki (eastern mosquitofish) populations.