alt=Electroenfoque en gradiente de pH|miniaturadeimagen|Esquema de la separación de moléculas mediante electroenfoque utilizando un gradiente de pH. |398x398px El isoelectroenfoque (o enfoque isoelectrico) es un método o técnica de trabajo utilizado en las separaciones por electroforesis. También recibe el nombre de electroenfoque y, a veces, el de IAF, que es un acrónimo procedente del nombre en inglés (IsoElectric Focusing). Esta técnica se utiliza para separar, mediante electroforesis, moléculas con diferentes puntos isoeléctricos, algo muy habitual en aminoácidos, péptidos y proteínas. Es, por consiguiente, que su principal campo de aplicación se encuentra relacionado con la biología molecular, principalmente de todo lo relacionado con las proteínas, ya que aprovecha el hecho de que la carga total de la molécula de interés, es decir, la densidad de carga neta, es función del pH de su entorno. Fundamento
Se basa en el desplazamiento de las moléculas en un gradiente de pH. Las moléculas anfotéricas, como los aminoácidos, se separan en un medio en el que existe una diferencia de potencial y un gradiente de pH. La región del ánodo es ácida y la del cátodo es alcalina. Las sustancias que inicialmente se encuentran en regiones de pH inferior a su punto isoeléctrico estarán cargadas positivamente y migraran hacia el cátodo, mientras aquellas que se encuentran en medios con pH más altos que su punto isoeléctrico tendrán carga negativa y migrarán hacia el ánodo. La migración las conducirá a una región donde el pH coincidirá con su punto isoléctrico, tendrán una carga neta nula y se detendrán. De esta forma las moléculas anfotéricas se sitúan en estrechas bandas donde coincide su punto isoeléctrico con el pH.
Véase también
Electroforesis Electroforesis en gel Electroforesis capilar Inmunoelectroforesis
Referencias
Categoría:Electroforesis