CP4 EPSPS est le nom donné à un gène. Il est l'un de ceux qui ont été le plus utilisé, par Monsanto notammentG. R. Heck & al. (Monsanto), Development and Characterization of a CP4 EPSPS-Based, Glyphosate-Tolerant Corn Event ; Crop Science ; Vol. 45 No. 1, , reçu le 16 dec 16 2002, publié en janvier 2005, doi: 10.2135/cropsci2005.0329 pour produire des semences de plantes génétiquement modifiées afin qu'elles résistent à ceux des désherbants totaux dont la matière active est le glyphosate.
Terminologie CP4 désigne le nom de la souche de bactérie Agrobacterium tumefaciens d'où a été tiré ce gèneBarry, G., Kishore, G., Padgette, S., Talor, M., Kolacz, K., Weldon, M., Re, D., Eichholtz, D., Fincher, K., Hallas, L., 1992. Inhibitors of amino acid biosynthesis: strategies for imparting glyphosate tolerance to plants. In: Singh, B.K., Flores, H.E., Shannon, J.C. (Eds.), Biosynthesis and Molecular Regulation of Amino Acids in Plants. American Society of Plant Physiology, Barry, G.F., Kishore, G.M., 1995. Glyphosate tolerant plants. United States Patent 5,463,175. ; "EPSPS "désigne une enzyme (5-énolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase) codée par le gène CP4.
Le gène « CP4 EPSPS » Ce gène code une enzyme d'origine bactérienne, l'EPSPS. Une fois injecté dans les plantes par transgénèse, , il y neutralise les effets effets phytotoxiques du glyphosate, le principe actif de certains herbicides totaux les plus vendus au monde, dont le Roundup™ est le plus connu.
Ce gène programme, dans le noyau des cellules des plantes OGM où il a été inséré la synthèse de l'enzyme 5-énolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase (EPSPS). Cette enzyme confère à la plante une tolérance au glyphosate en l'empêchant d'atteindre sa cible par la modification d'un acide aminéAvis sur le Mais-NK603, Comité Scientifique du « Haut Conseil des biotechnologies ».
Technique de transgenèse D'autres techniques d'insertion sont théoriquement possibles, mais ce gène a été inséré dans le maïs transgénique et d'autres plantes par la méthode du « bombardement » des cellules végétales par des microparticules d'ADN purifié (biolistique). C'est le cas par exemple dans le maïs génétiquement modifié NK 603 de Monsanto.
L’EPSP synthase est la cible de la matière active de certains herbicides tels que le glyphosate (N-phosphono méthyl-glycine), qui doit néanmoins aussi être associé à un surfactant pour bien pénétrer la plante.
Exemple d'utilisations En tant que conférant une résistance au glyphosate, il avait par exemple - en 2004 - déjà été inséré par transgenèse dans plusieurs variétés de maïs ; dont maïs GA21 (Roundup Ready®), MON80100, MON802 (Yeildgard®), MON809, MON810 (Yeildgard®), MON832 ou NK603(Roundup Ready®) ; du soja (GTS 40-3-2 (Roundup Ready®) ; du colza OGM (GT200 (Roundup Ready®), GT73, RT73 (Roundup Ready®) ; une pomme de terre (RBMT21-350, RBMT22-082)B Miki, S McHugh, Selectable marker genes in transgenic plants: applications, alternatives and biosafety ; Journal of Biotechnology, 2004 ; Elsevier ; Journal of Biotechnology 107 (2004) 193–232 pour ne citer que les espèces les plus cultivées, mais on l'a aussi inséré dans le génome d'une herbe commune (l'Agrostis stolonifera).
Évaluation des risques Les niveaux de risque de pollution génétique (sur les plantes parentes du maïs (téosinte) ou d'autres OGM (Agrostis stolonifera) et d'éventuels risques toxicologiques ou écotoxicologiques sont très discutés pour le maïs qui, s'il n'a de plantes parentes en Europe, en a en Amérique centrale. Une pollution génétique a été démontrée possible pour une autre herbacée génétiquement modifiée, l' Agrostis stolonifera, notamment utilisée sur les golfs.
Sécurité alimentaire Des expériences de digestion in vitro (dans deux liquides simulant le liquide stomacal et le milieu intestinal) des protéines nouvellement exprimées par le soja transgénique ont notamment porté sur la CP4-EPSPS. Selon ce modèle in vitro, la digestion en est rapide dans l'estomac (quelques secondes), et lente dans l'intestin (240 minutes ou plus dans le modèle artificiel), mais la digestibilité de CP4-EPSPS est dans ce cas augmentée par le préchauffage. C'est selon les auteurs un argument en faveur d'un risque allergène Shokuhin Eiseigaku Zasshi ; Increased digestibility of two products in genetically modified food (CP4-EPSPS and Cry1Ab) after preheating, ; 2002, vol43, , , (résumé).
Selon Monsanto, le risque sanitaire via l'alimentation n'existe pas : Le groupe semencier estime que . La protéine CP4 EPSPS (qui peut être retrouvée par PCR est considérée comme un « marqueur » de certaines transgenèse permettant une résistance au glyphosateLS Watrud & al., Evidence for landscape-level, pollen-mediated gene flow from genetically modified creeping bentgrass with CP4 EPSPS as a marker Published online before print September 24, 2004, doi: 10.1073/pnas.0405154101 PNAS (National Acad Sciences) ; 2004-10-05, vol. 101 ; 14533-14538 .
Pollution génétique La première (et seule ?) étude publiée de suivi in situ et à grande échelle de gènes modifiés de l'herbacée Agrostis stolonifera, faite par l'Agence américaine de protection de l'environnement (National Health and Environmental Effects Research Laboratory) conjointement avec l'U.S. Geological Survey et la Dynamac Corporation a conclu (en 2004) à une large diffusion du pollen des A. stolonifera génétiquement modifiés. Ce pollen s'est montré - en situation réelle - capable de féconder des individus de la même espèce situés jusqu'à (sous le vent dominant des parcelles « sources »). Il s'est également montré capable de produire des hybrides viables et résistants au glyphosate (les hybrides de cette espèce peuvent se maintenir en populations importantes, même s'ils sont moins féconds, grâce à leur stolons ; leur résistance au glyphosate pourrait aussi les favoriser dans les champs traités avec cet herbicide et en faire une potentielle « super-mauvaise herbe »).
Cette étude a démontré l'existence d'une pollution génétique à grande distance se produisant facilement pour cette espèce, et les auteurs ont suggéré que d'autres travaux soient faits pour préciser le risque et degré d'introgression de ces transgènes dans les populations naturelles car si l'essentiel du flux de pollen « marqué par le transgène » a fécondé des plantes situées dans les situés en aval (par rapport au vent dominant), d'autres plants suivis ont été fécondés jusqu'à et respectivement pour les « plantes sentinelles » (plantes placées dans des parcelles volontairement éloignées de champs d'Agrostis, pour minimiser la pollinisation par des plantes conventionnelles, à la différence des « plante résidentes », qui étaient des plantes-témoins naturellement situées dans leur environnement habituel) suivies par les chercheurs ; 75 des 138 plantes sentinelles et 29 de 69 plantes résidentes suivies par les scientifiques ont été fécondées par du pollen transgénique. La surface « contaminée » par du pollen transgénique issu des parcelles expérimentales était d'environ ; De plus, une fécondation croisée s'est également produite avec quelques Agrostis gigantea (espèce-cousine de A. stolonifera (alors qu'aucun croisement n'a été observé avec Polypogon monspeliensis, espèce proche mais d'un genre différent) ; Une contamination interspécifique est donc également possible (avérée pour ces deux espèces) ; or, Agrostis gigantea est également une espèce considérée comme « mauvaise herbe » par les agriculteurs, ce qui peut être jugé préoccupant selon Christian Huyghe (chef de l'Unité de recherche prairies et fourragères de l'Institut national de la recherche agronomique (INRA) Hervé Morin, le Monde, Le pollen volant des greens OGM, 21.09.04 ; article paru dans l'édition du 22.09.2004).
Dysfécondation du coton transgénique exposé au glyphosate avant floraison Le cotonnier produit une fleur hermaphrodite. Cette fleur contient donc à la fois les organes mâles de la reproduction (androcée) et les organes femelles (gynécée). Cet hermaphroditisme favorise un taux important (50 à 100 %) d'autofécondation, ce qui est une caractéristique intéressante pour les semenciers-sélectionneurs ; Ce taux est presque toujours de 100 % chez certaines variétés de coton dont la fleur reste ferméeAFD, Cotonnier (Gossypium hirsutum) ; La sexualité chez les plantes - Mode de reproduction, Antenne de Formation à Distance (AFD) de l'université de Louvain (AFD-LV) ; hormis quand les pétales de la fleur sont percées par certains insectes butineurs . Normalement, le pollen du coton (lourd, épineux et difficilement emporté par le vent) se déverse directement sur le stigmate (pointe du pistil) quand les anthères s'ouvrent, et/ou il est apporté par des insectes (ex ; abeilles, bourdon mais les insectes sont devenus rares sur les champs de coton en raison de l'abondance des traitements insecticides)JN Jenkins, Le coton, OCDE, PDF, 63 pages (voir chap "mécanisme de reproduction) /63 de la version PDF. Cependant cette fécondation se fait mal chez les cotonniers transgéniques exposés au désherbants auquel ils ont été rendus résistants : Des traitements au glyphosate de cotonniers (cotton, Gossypium hirsutum L. ‘Delta Pine & Land 5415RR’, ‘Delta Pine & Land 50’, ‘Delta Pine & Land 90’, ‘SureGrow 125RR’) génétiquement modifiés pour résister à cette matière active de désherbant ont été associés à deux problèmes conjoints : 1°) une mauvaise pollinisationWendy A. Pline, Ryan Viator, John W. Wilcut, Keith L. Edmisten, Judith Thomas, and Randy Wells (2002) Reproductive abnormalities in glyphosate-resistant cotton caused by lower CP4-EPSPS levels in the male reproductive tissue. Weed Science: July 2002, Vol. 50, No. 4, . doi: https://dx.doi.org/10.1614/0043-1745(2002)050[0438:RAIGRC]2.0.CO;2 (résumé et 2°) une augmentation du taux d'avortement des capsules de cotonnier transgénique, ce qui pose un problème agronomique (perte de rendement), et environnemental (car l'apparition conjointe à l'augmentation des traitements herbicides depuis quelques années de mauvaises herbes résistantes aux désherbants totaux peut inciter à un usage croissant de ces produits (ex Amaranthus palmeriJared R. Whitaker, Alan C. York, David L. Jordan, and A. Stanley Culpepper (2011) Weed Management with Glyphosate- and Glufosinate-Based Systems in PHY 485 WRF Cotton. Weed Technology: April-June, Vol. 25, No. 2, . doi: https://dx.doi.org/10.1614/WT-D-10-00008.1 (résumé)). Des études anatomiques ont donc recherché d'éventuels effet des traitements au glyphosate sur le développement des organes reproducteurs mâle et femelle de la fleur de cotonnier GM en période d'anthèse (période « fonctionnelle » pour la reproduction de la fleur). Les chercheurs ont comparé des cotonniers-OGM traités et non-traités au glyphosate (appliqué à la fois en postlevée (POST)au stade « quatre feuilles » et à la phase POST « huit feuilles ». Ils ont constaté que le traitement avait effectivement un effet différé sur l'anatomie florale : il allonge la colonne staminale, ce qui augmente très significativement la distance entre les anthère et la pointe de l'organe femelle (stigmate réceptif) ; Cette distance est augmentée de 4,9 à au cours de la première semaine de floraison. Cette éloignement des anthères par rapport au stigmate a provoqué une diminution de 42 % de la quantité de pollen effectivement déposé sur les stigmates chez les cotonniers OGM traitées au glyphosate par rapport à ceux qui n'ont pas été traités.