Le milieu Sabouraud est un milieu de culture légèrement sélectif utilisé en microbiologie pour la culture de toutes sortes d'espèces fongiques peu exigeantes, qu'il s'agisse de moisissures (champignons filamenteux) ou de levures (champignons unicellulaires). Sa formulation simple est proposée par Raymond Sabouraud à la fin du dans une série de publications abordant la question de la standardisation des milieux de culture utilisés pour le diagnostic des dermatophytoses, et en particulier des teignes.
C'est toujours l'un des milieux de culture fongique les plus courants en laboratoire. Avec une composition actualisée, il fait partie des milieux recommandés pour la culture (surtout secondaire, c'est-à-dire après isolement) des champignons pathogènes dans les prélèvements cliniques KC Hazen & SA Howell « Processing specimen for fungal culture » in: Leber AL (ed.) Clinical microbiology procedures handbook. Washington, DC : ed, 2016, . KL McGowan « Specimen selction, transport and processing : mycology » in: Jorgensen JH & Pfaller MA (eds.) Manual of clinical microbiology. ed, 2015, . .
Principe La formule d'origine de R. Sabouraud était dérivée de la composition du moût de bière, qui donnait de bons résultats pour la culture des dermatophytes mais n'était pas standardisée. Elle comportait de peptone, d'un glucide quelconque (maltose principalement, mais aussi glucose, lactose, mannitol) et de la gélatine en quantité suffisante pour solidifier le milieu.
Actuellement le glucide utilisé est presque toujours le D-glucose ou dextrose, d'où le nom de « gélose Sabouraud dextrosée » (Sabouraud dextrose agar, ou SDA). Sa concentration élevée favorise une production abondante de déchets acides sous l'effet du métabolisme fongique, et l'acidification qui s'ensuit participe à l'inhibition des contaminants bactériens éventuels. Un mélange de peptones complète la base nutritive. Le pH est ajusté en zone faiblement acide à l'aide d'acide chlorhydrique.
L'agar est l'agent gélifiant.
Composition La variabilité de la composition des géloses Sabouraud commerciales a été soulignée dans la littérature. Une formulation proche de la version originale est la suivante, pour de milieu « Sabouraud Glucose Agar (Sabouraud Dextrose Agar) » in: Atlas RM. Handbook of microbiological media. Boca Raton : CRC Press, Taylor & Francis Group, 4th ed, 2010, p. 1530. : glucose : peptone pancréatique de caséine : peptone peptique de viande : agar : .
Ajuster le pH à 5,6 ± 0,2 à (après autoclavage).
Variantes Sabouraud Emmons La variante la plus notable est celle décrite par C.W. Emmons en 1977, dans laquelle la quantité de glucose est divisée par deux et le pH ramené à 6,9 ± 0,1 Emmons CW Medical mycology. Philadelphia : Lea & Febiger, 3rd ed, 1977, p. 535. . Ces modifications sont destinées à assurer une croissance optimale de la majorité des espèces fongiques pathogènes.
Autres L'agar peut être omis pour obtenir un milieu liquide (bouillon Sabouraud)« Sabouraud Glucose Broth » in: Atlas RM. Handbook of microbiological media. Boca Raton : CRC Press, Taylor & Francis Group, 4th ed, 2010, p. 1531. .
L'inhibition des contaminants bactériens, partiellement assurée par la faible acidité du milieu Sabouraud original, peut être renforcée par des antibiotiques. Les fournisseurs proposent ainsi diverses formulations sélectives additionnées de chloramphénicol, gentamicine, pénicilline, streptomycine, tétracycline T Acharya & J Hare « Sabouraud dextrose agar & other fungal growth media » in: Gupta VK & Tuohy MG. Laboratory protocols in fungal biology. Cham : ed, 2022, Springer, Du cycloheximide peut aussi être incorporé pour limiter la croissance des moisissures saprophytes.
La culture de la levure lipophile Malassezia furfur peut être facilitée en déposant de l'huile d'olive stérile à la surface d'une gélose Sabouraud. Une alternative consiste à incorporer de l'huile d'olive et du polysorbate 80 (« ») directement dans le milieu de base avant l'autoclavage « Sabouraud Glucose Agar with Olive Oil » in: Atlas RM. Handbook of microbiological media. Boca Raton : CRC Press, Taylor & Francis Group, 4th ed, 2010, p. 1531. .
Un milieu Sabouraud Emmons additionné de TTC a été utilisé dans une méthode expérimentale de phénotypage des sous-espèces de Candida.
Préparation Aucun ingrédient n'étant thermosensible, il suffit de les dissoudre à chaud dans le volume correspondant d'eau distillée et de stériliser à l'autoclave ( à ). Le mélange est ensuite réparti dans des contenants stériles.
Notes et références
Articles connexes
Boîte de Petri Raymond Sabouraud
Sabouraud, milieu