Fece il suo esordio da bambina, ricoprendo il ruolo di Samantha nella sitcom Casalingo Superpiù. Nel corso degli anni novanta ha partecipato a diverse pellicole cinematografiche e televisive, e in particolare ha raggiunto la notorietà prendendo parte alle serie televisive Melrose Place e Streghe, dove interpreta Phoebe Halliwell, una delle protagoniste, fino al 2006.
Durante gli anni novanta ha intrapreso anche la carriera di cantante, realizzando quattro album in studio, una compilation, cinque singoli e altrettanti video musicali, riscuotendo successo anche in Europa e in Giappone.
Biografia Nasce a New York City (Brooklyn) ma cresce a Staten Island. Figlia di genitori italo-americani, Lin Milano modista e scopritrice di talenti e Thomas M. Milano, compositore di colonne sonore. Ha un fratello, Cory, nato nel 1982, cantante del gruppo Chloroform Days e attore. È cugina dell'attore Eric Lloyd.
Inizia la sua carriera a otto anni quando ottiene la parte a un'audizione per un tour nazionale di Annie a Broadway. È apparsa in spot televisivi e altre produzioni di Broadway. A undici anni guadagna il suo primo ruolo importante nella serie televisiva Casalingo Superpiù, al fianco di Tony Danza, Judith Light, Danny Pintauro e Katherine Helmond. Interpretava Samantha, la figlia di Tony Micelli. Ottenuta la parte, la sua famiglia si trasferisce da Staten Island a Hollywood.
Nel 1985 fu ingaggiata nel film Commando nei panni di Jenny, figlia di John Matrix (interpretato da Arnold Schwarzenegger). Nel 1988 il suo volto ispira i disegnatori de La sirenetta per la creazione del personaggio di Ariel. Sul palcoscenico ha recitato in Tender Offer, una commedia ad atto unico scritta da Wendy Wasserstein, All Night Long dell'autore americano John O'Keefe, e nel primo adattamento americano del musical Jane Eyre. È tornata in teatro nel 1991, producendo e recitando in Butterflies Are Free. Nel 1996 appare nel video del singolo Josie dei Blink-182.
Dopo l'esperienza in Casalingo Superpiù (1984-1992), nei primi anni 90 fece diversi provini, anche per b-movie, e nel 1995 recitò completamente nuda in Embrace of the vampire, desiderosa di levarsi di dosso l'immagine da brava ragazza, esibendosi in scene di sesso, anche a tre, piuttosto esplicite; successivamente approdò in televisione dove ottenne maggiore successo nelle vesti di Jennifer Mancini in Melrose Place (1997-1998), Meg Winston in Spin City e Phoebe Halliwell in Streghe (1998-2006). Sia lei sia l'amica intima Holly Marie Combs diventano produttrici esecutive di Streghe durante la quinta stagione dello show. La serie, che è stato un grande successo di pubblico, si è poi conclusa con l'ottava stagione.
Nel 2007 prende parte alla serie televisiva Reinventing the Wheelers. L'anno successivo apparve in dieci episodi della serie My Name Is Earl. Lo stesso anno appare in alcuni spot pubblicitari per Veet, SheerCover e ProActiv Solution. Sempre nel 2007 prende parte alla produzione speciale di TBS Hot Corner della Major League Baseball. realizzando servizi al Fenway Park durante l'American League Division Series tra i Boston Red Sox e i Los Angeles Angels e altri al Chase Field durante la National League Championship Series tra gli Arizona Diamondbacks e Colorado Rockies.
Nel 2008 recita nel film Pathology, con Milo Ventimiglia, ed entra nel cast di una nuova serie televisiva comica Single with Parents per la stagione 2008-2009, successivamente cancellata. Lo stesso anno affianca James Caan e Jason Gedrick nel film Disposta a tutto, diretto da Jerry Ciccoritti. Nel 2009 prende parte a un'altra serie televisiva, Romantically Challenged, dove interpreta Rebecca, per la regia di Ricky Blitt, già sceneggiatore de I Griffin.
Ha anche partecipato ad alcune parodie realizzate dal sito web Funny or Die: The Uncler, parodia del film The Wrestler, e Alyssa Milano's Evolution: Jersey Shore, parodia del reality show Jersey Shore. Lo stesso anno pubblica il suo primo libro, Safe at Home: Confessions of a Baseball Fanatic, una sorta di autobiografia, nella quale racconta le origini della sua passione per il baseball, e di come tale passione ha influenzato la sua vita nel corso degli anni. Nel 2013 e 2014 ha recitato nella serie televisiva Mistresses - Amanti, dove interpreta Savi, una delle quattro donne protagoniste; lascia la serie al termine della seconda stagione per rimanere a Los Angeles con la famiglia in seguito allo spostamento del set della serie a Vancouver. Inoltre durante The Wendy Williams Show l’attrice ha ammesso di essere stata l’ispirazione per il personaggio di Ariel nel film La sirenetta della Disney.
Vita privata Dopo aver avuto una breve relazione nel 1993 con l'attore Scott Wolf, il 1º gennaio 1999 si è sposata con Cinjun Tate del gruppo Remy Zero. I due divorziano nel dicembre dello stesso anno. Dall'agosto 2001 al gennaio 2002 ha avuto una relazione con il collega Brian Krause con cui ha recitato in Streghe. Inoltre sempre nei primi anni 2000 ha avuto una relazione con il cantante Justin Timberlake. Il 15 agosto 2009 sposa David Bugliari, anch'egli di origini italo americane, agente della Creative Artists Agency: la coppia ha avuto due figli.
Filantropia È stata nominata ambasciatrice del Global Network for Neglected Tropical Diseases, associazione per il controllo delle malattie tropicali alla quale ha donato 250.000 dollari. È inoltre ambasciatrice dell'UNICEF per gli Stati Uniti. È andata in India e in Angola, per lavorare con i delegati dell'UNICEF impegnati in queste zone. Nell'autunno 2004, ha dato il via alla campagna Trick-or-Treat for UNICEF in qualità di portavoce ufficiale. Ha raccolto la cifra approssimativa di 50.000 dollari per le donne e i bambini del Sudafrica malati di AIDS. È apparsa in molte campagne pubblicitarie della PETA. Oltre alla PETA, Milano supporta l'organizzazione per la protezione della vita marina Sea Shepherd. Insieme a Eva Longoria, Alyssa Milano si impegna per pene più severe per chi abusa degli animali. Insieme all'autrice Debbie Rigaud, Milano ha pubblicato due libri per bambini per «ispirare una generazione di benefattori».
Filmografia Cinema Old Enough, regia di Marisa Silver (1984) Commando, regia di Mark L. Lester (1985) La corsa più pazza del mondo 2 (Speed Zone!), regia di Jim Drake (1989) Tutti conoscono Roberta (Little Sister), regia di Jimmy Zeilinger (1992) I dannati di Hollywood (Where the Day Takes You), regia di Marc Rocco (1992) Conflitto d'interessi (Conflict of Interest), regia di Gary Davis (1993) Double Dragon, regia di James Yukich (1994) Deadly Sins, regia di Michael Robison (1995) Embrace of the Vampire, regia di Anne Goursaud (1995) Ultimo appello (Glory Daze), regia di Rich Wilkes (1995) Jimmy Zip, regia di Robert McGinley – cortometraggio (1996) La mia peggiore amica 2 (Poison Ivy II), regia di Anne Goursaud (1996) Paura (Fear), regia di James Foley (1996) Ricercati vivi o morti (Public Enemies), regia di Mark L. Lester (1996) Party fatale (Below Utopia), regia di Kurt Voß (1997) Piscine - Incontri a Beverly Hills (Hugo Pool), regia di Robert Downey Sr. (1997) Mai dire sempre (Buying the Cow), regia di Walt Becker (2002) Kiss the Bride, regia di Vanessa Parise (2002) Dickie Roberts - Ex piccola star (Dickie Roberts: Former Child Star), regia di Sam Weisman (2003) The Blue Hour, regia di Eric Nazarian (2007) Pathology, regia di Marc Schölermann (2008) Il fidanzato della mia ragazza, regia di Daryn Tufts (2010) Libera uscita (Hall Pass), regia di Peter e Bobby Farrelly (2011) Capodanno a New York (New Year's Eve), regia di Garry Marshall (2011) Little Italy - Pizza, amore e fantasia (Little Italy), regia di Donald Petrie (2018) Brazen, regia di Monika Mitchell (2022) Who Are You People, regia di Ben Epstein (2023) Driver's Ed - Guida contromano (Driver's Ed), regia di Bobby Farrelly (2025)
Televisione Casalingo Superpiù (Who's the Boss?) – serie TV, 196 episodi (1984-1992) Il fantasma di Canterville (The Canterville Ghost), regia di Paul Bogart – film TV (1986) Driving Academy - Scusi, dov'è il freno? (Crash Course), regia di Oz Scott – film TV (1988) La sera del ballo (Dance 'Til Dawn), regia di Paul Schneider – film TV (1988) Living Dolls – serie TV, episodi 1x01-1x02 (1989) The American Film Institute Presents: TV or Not TV?, regia di Jay Dubin – film TV (1990) Casualties of Love: The Long Island Lolita Story, regia di John Herzfeld – film TV (1993) Candles in the Dark, regia di Maximilian Schell – film TV (1993) A casa con i Webber (The Webbers), regia di Brad Marlowe – film TV (1993) Confessions of a Sorority Girl, regia di Uli Edel – film TV (1994) Oltre i limiti (The Outer Limits) – serie TV, episodio 1x17 (1995) Disposta a tutto (The Surrogate), regia di Jan Egleson e Raymond Hartung – film TV (1995) Il coraggio del cuore (To Brave Alaska), regia di Bruce Pittman – film TV (1996) Melrose Place – serie TV, 40 episodi (1997-1998) Spin City – serie TV, episodi 2x11-5x17 (1997-2001) Corsa all'oro (Goldrush: A Real Life Alaskan Adventure), regia di John Power – film TV (1998) Fantasilandia (Fantasy Island) – serie TV, episodio 1x02 (1998) Streghe (Charmed) – serie TV, 178 episodi (1998-2006) - Phoebe Halliwell The Diamond Hunters, regia di Dennis Berry – miniserie TV (2001) I Griffin (Family Guy) – serie TV, episodio 3x03 (2001) Reinventing the Wheelers, regia di Lawrence Trilling – episodio pilota scartato (2007) My Name Is Earl – serie TV, 10 episodi (2007-2008) Single with Parents, regia di Michael Engler – episodio pilota scartato (2008) Disposta a tutto (Wisegal), regia di Jerry Ciccoritti – film TV (2008) Castle – serie TV, episodio 2x12 (2010) Domeniche da Tiffany (Sundays at Tiffany's), regia di Mark Piznarski – film TV (2010) Romantically Challenged – serie TV, 6 episodi (2010-2011) Breaking In – serie TV, episodi 1x02 e 2x09 (2011-2012) Mistresses - Amanti (Mistresses) – serie TV, 26 episodi (2013-2014) America's Next Drag Queen (RuPaul's Drag Race) (2015) Wet Hot American Summer: Ten Years Later – serie TV, 5 episodi (2017) Insatiable – serie TV, 18 episodi (2018-2019) Una proposta seducente (Tempting Fate), regia di Manu Boyer e Kim Raver – film TV (2019) Grey's Anatomy – serie TV, episodio 16x03 (2019) You Are My Home, regia di Amanda Raymond – film TV (2020) The Now – serie TV (2021) Elsbeth – serie TV, episodi 2x14 e 2x20 (2025)
Doppiatrice Lilli e il vagabondo II - Il cucciolo ribelle (Lady and the Tramp II: Scamp's Adventure), regia di Darrell Rooney e Jeannine Roussel (2000) Le avventure di Jimmy Neutron (The Adventures of Jimmy Neutron: Boy Genius) – serie TV, episodi 2x18-2x20 (2004) Dinotopia - Alla ricerca del rubino del sole (Dinotopia: Quest for the Ruby Sunstone), regia di Davis Doi (2005) Ghostbusters, regia di Kody Sabourin e David Wheeler – videogioco (2009) Kick Chiapposky - Aspirante stuntman (Kick Buttowski: Suburban Daredevil) – serie TV, episodio 1x20 (2010) DC Showcase: The Spectre, regia di Joaquim Dos Santos – cortometraggio (2010) Beverly Hills Chihuahua 2, regia di Alex Zamm (2011) Planes, regia di Klay Hall (2013)
Videoclip Teen Steam (1988) Josie, Blink-182 (1996)
Discografia Gli album furono commercialmente disponibili esclusivamente in Giappone, ad eccezione di un singolo disponibile solo in Francia ed un altro disponibile solo negli Stati Uniti d'America.
Album 1989 – Look in My Heart (Pony Canyon) 1989 – Alyssa (Pony Canyon) 1991 – Locked Inside a Dream (Pony Canyon) 1992 – Do You See Me (Pony Canyon)
Singoli 1989 – What a Feeling 1989 – Look In My Heart 1989 – Straight to the Top 1989 – I Had a Dream 1989 – Happiness 1990 – The Best in the World 1990 – I Love When We're Together (non contenuto nell'album) 1991 – New Sensation 1991 – Voices That Care (non contenuto nell'album) 1992 – Do You See Me? 1993 – No Secret (pubblicato solo in Francia)
Compilation 1990 – The Best in the World (Pony Canyon)