La colina O-acetiltransferasi, spesso abbreviata ChAT, è un enzima appartenente alla classe delle transferasi, che catalizza la seguente reazione: acetil-CoA + colina ⇄ CoA + acetilcolina Ovvero è necessaria per sintetizzare il neurotrasmettitore acetilcolina a partire da colina ed acetil-coenzima A. Il propanoil-CoA può agire, anche se più lentamente, al posto dell'acetil-CoA.

La ChAT è sintetizzata nel corpo dei neuroni e trasferita alla terminazione nervosa attraverso il flusso assonico. Nell'uomo è sintetizzata e codificata a partire dal gene CHAT.

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