miniaturadaimagem|312x312px| Estrutura terciária do SNX9 que dá uma ideia da estrutura terciária do SNX8, uma vez que a estrutura primária compartilha 20% de identidade de sequência e 0,3 de similaridade de sequência com a estrutura primária SNX8. O SNX8 é uma proteína nexina de classificação envolvida no tráfego molecular intracelular dos primeiros endossomos para o TGN. Sugere-se que atue como proteína adaptadora em eventos relacionados à resposta imune e regulação do colesterol, por exemplo. Como uma proteína da família SNXs, a SNX8 é formada por 465 aminoácidos e apresenta um domínio BAR e um domínio PX que são muito relevantes em relação às suas funções. Além disso, o estudo SNX8 é motivado por sua importância médica em relação a enfermidades como a doença de Alzheimer, câncer, malformações do neurodesenvolvimento e por seu papel no combate às infecções virais.
Estrutura Classificação de Nexins (SNXs) SNX8 pertence à família das proteínas de classificação nexina, que contém principalmente duas ligações de membrana funcionais que permitem que os SNXs tenham importâncias diferentes na classificação endossômica e no tráfego de proteínas graças à sua capacidade de curvatura da membrana. Para iniciar, SNX-PX é um domínio distinto de ligação a fosfoinositídeo (PI). A interação preferencial deste domínio com os lipídios da membrana faz com que a função principal do SNX-PX seja o direcionamento das proteínas ao fosfatidilinositol-3-fosfato (PI (3) P) aos endossomos. Por outro lado, o domínio BAR (Bin / anfifisina / Rvs) é um regulador chave da classificação endossômica tubular mediada por fosfoinositídeo. Consequentemente, este domínio também se dimeriza para detectar, estabilizar e induzir a curvatura da membrana. As proteínas SNX-BAR que contêm ambos os domínios são uma parte dos microdomínios tubulares de alta curvatura enriquecidos com fosfoinositídeo da rede endo-lisossomal.
o genoma de mamífero contém 12 genes que codificam para as proteínas SNX-BAR (SNX1, SNX2, SNX4, SNX9, SNX18, SNX32 e SNX33). Outros domínios, como PDZ (proteína de densidade pós-sináptica-95, discos grandes, zona ocludente-1), SH3 (homologia Src 3) e RA (associado a Ras), estão envolvidos nas interações proteína-proteína.
SNX8 A proteína SNX8, embora seja muito semelhante às demais nexinas de classificação, apresenta uma estrutura de domínio que mais se assemelha a SNX1 e SNX9; por esse motivo, embora sua estrutura terciária permaneça desconhecida, teoricamente se assemelharia à do SNX9 mostrada no modelo acima. No geral, a proteína SNX8 é integrada por uma única cadeia peptídica que possui 465 aminoácidos com massa molecular de 52,569 Da.
Terminus N contendo domínio PX SNX8 contém um domínio PX em seu N-terminal, que está localizado entre os aminoácidos 71 e 181. Um domínio de homologia com o domínio PX de levedura fica localizado entre os aminoácidos 75 e 178 dentro deste domínio. Por se tratar de um domínio de ligação a fosfoinositídeo, é importante destacar os aminoácidos 109, 135 e 148 como resíduos diretamente relacionados ao fosfatidilinositol 3 por serem sítios de ligação específicos, constituindo um sítio de ligação de fosfoinositídeo com um intervalo de 40 aminoácidos. Além disso, inclui um par de tirosinas fosforiláveis nas posições 95 e 126 que são fundamentais em sua função na via de sinalização não canônica mediada por IKKβ acionada por IFNγ. Em geral, a função principal do domínio PX é direcionar SNX8 principalmente para endossomos iniciais e outras membranas ricas em fosfatidilinositol 3-fosfolipídios.
Terminus C contendo domínio BAR SNX contém um domínio BAR em seu terminal C, que está localizado entre os aminoácidos 256 e 440. Sua capacidade de formar revestimentos em membranas a fim de induzir sua curvatura é fundamental para a participação do SNX8 na formação de estruturas tubulares. Além disso, o terminal C SNX8 contém uma treonina na posição 452 e uma serina na posição 456 que pode passar por alterações pós-traducionais que induzem sua fosforilação, resultando em uma fosfotreonina e uma fosfoserina. Portanto, são classificados como sítios de fosforilação.
Ortólogo MVP1 SNX8 contém uma proteína ortóloga de levedura, a MVP1 codificada pelo também homólogo gene Mvp1p, que também realiza um papel mediador do transporte de carga para os compartimentos vacuolar e lisossomal. Por esta causa, sua investigação pode levar a um melhor entendimento das funções SNX8 em células humanas.
Funções biológicas e seus mecanismos moleculares SNX8 é considerada uma proteína adaptadora envolvida na via de transporte do endossomo para Golgi, participando da endocitose e da classificação e sinalização endossômica. Ele regula negativamente o transporte retrógrado de proteínas intracelulares do compartimento do endossomo inicial para a rede trans-Golgi de uma maneira mediada por retrômero. SNX8 é, portanto, localizado em endossomos preliminares, como sua co-localização com componentes do retrômero como SNX1, SNX2, Vps26 e Vps35 foi demonstrada por alguns estudos (e também com EEA1). Além disso, a dinâmica das estruturas endossômicas com domínios de membrana enriquecidos com SNX8 são reguladas pelas proteínas motoras opostas dineína-1 contendo LIC1 e cinesina-1, ambas as quais permitem o movimento de carga mediado por SNX8 através do citosol, exercendo forças sobre essas estruturas. As funções biológicas de SNX8 que os estudos foram aprofundados, todas as quais envolvem seu papel no transporte endossômico intracelular, são explicadas em mais detalhes nas seções seguintes.
Resposta imune inata Resposta desencadeada por vírus de RNA citosólico SNX8 é um componente muito importante na indução da transcrição do gene antiviral efetor downstream em resposta a vírus de RNA, uma vez que é necessário para a ativação mediada por RLR do promotor IFNβ que leva à defesa do hospedeiro de uma maneira dependente da dose. Regula positivamente a agregação e ativação de VISA, uma proteína adaptadora chave envolvida na resposta imune inata contra este tipo de infecções; este processo é crítico no recrutamento de outros componentes de sinalização. Embora a localização padrão do SNX8 inclua o citoplasma e outros compartimentos, como o ER, o compartimento intermediário ER-Golgi, o aparelho de Golgi ou endossomos, está parcialmente localizado na mitocôndria. Além disso, as infecções virais de RNA causam a translocação de SNX8 do citosol para a mitocôndria. Durante o estágio inicial da infecção, a associação do SNX8 com o VISA aumenta acima dos níveis constitutivos (a degradação do VISA em estágios posteriores resulta em uma redução desse fenômeno). Estruturalmente, o domínio transmembranar do terminal C de VISA e tanto o domínio PX do terminal N como o terminal C de SNX8 são necessários para esta ligação. A formação do complexo SNX8-VISA potencializa a polimerização e agregação semelhante ao prião VISA. Após a ativação do VISA, sua acumulação permite o recrutamento de componentes de sinalização que desempenham um papel na ativação da resposta antiviral mediada por RLR, como os intermediários desta via TBK1, IRF3, IκBα ou ISRE. A ativação cooperativa de IRF3 com fator de transcrição NF-κB por meio de fosforilação leva à indução da transcrição do promotor IFNβ. Exemplos de genes cuja expressão desencadeada pelo vírus de RNA é estimulada por SNX8 são IFNB1, ISG56 e IL6 (sendo IL6 e IFNB1 relacionados à secreção de citocinas).
Além disso, SNX8 também desempenha um papel em RIG-I contendo ativação mediada por domínio CARD e mediada por MDA5 do promotor IFNβ, uma vez que VISA funciona como um intermediário para ambas as vias de sinalização. O mecanismo de recrutamento de SNX8 para VISA permanece obscuro, embora duas opções tenham sido sugeridas: a translocação de RIG-I ou MDA5 ligado a RNA viral para VISA pode resultar em uma mudança conformacional que aumentaria sua afinidade para SNX8 ou o vírus de RNA pode induzir pós -modificações translacionais de uma dessas proteínas permitindo a translocação de SNX8 para mitocôndrias para sua interação com VISA.
Resposta desencadeada por vírus de DNA citosólico SNX8 é um componente-chave na indução da transcrição do gene antiviral efetor downstream em resposta aos vírus de DNA, pois é necessário para a ativação mediada por MITA do promotor IFNβ de uma maneira dependente da dose. Ele regula a ativação de MITA, uma proteína adaptadora central na resposta imune inata a infecções virais de DNA que ativa e inicia a resposta antiviral, permitindo sua associação com a maquinaria translocon contendo fosfatilinositol 3 quinase VPS34 classe III para formar o MITA - Vps34 complexo de translocação; esta ligação é crucial para o transporte de MITA do ER para estruturas pontuadas microssômicas perinucleares, que são induzidas por infecção de vírus como o HSV-1, via tráfego intracelular mediado por Golgi. Esta via de transporte do MITA é vital para o início da resposta imunológica. SNX8 é sugerido para desempenhar um papel na ativação de MITA através desta via de transporte, modulando sua fosforilação na serina na posição 366 e recrutando o fator de transcrição IRF3 cuja ativação é importante na ativação da transcrição do promotor IFNβ. Esta hipótese é apoiada pelo fato de que MITA, SNX8 e VPS34 colocalizam no citoplasma, e que a localização de SNX8 no ER, compartimento intermediário ER-Golgi, Golgi e endossomos é semelhante à de MITA. Exemplos de genes cuja expressão desencadeada por vírus de DNA é estimulada por SNX8 são IFNB1, ISG56, CXCL10 e IL6 (sendo IFNB1 e IL6 relacionados à secreção de citocinas).
Via de sinalização não canônica mediada por IKKβ desencadeada por IFNγ SNX8 é um componente de uma via de sinalização não canônica mediada por IKKβ desencadeada pelo interferon gama, que ocorre paralelamente à via mediada por JAK-STAT1 induzida por IFNγ mais conhecida. No geral, ele participa de uma série de reações químicas e interações moleculares que levam à promoção seletiva de um subconjunto específico de transcrição de genes efetores a jusante que codificam GTPases induzidas por IFNγ da família GBP, que participam da defesa do hospedeiro contra patógenos intracelulares e secreção proteínas da família das quimiocinas como CXCL9, CXCL10 e CXCL11 que apresentam atividade antimicrobiana direta. Além disso, SNX8 aumenta a ativação induzida por IFNγ do promotor IRF1 de uma maneira dependente da dose.
Especificamente, as etapas dessa via que são reguladas pelo SNX8 são as seguintes:. A recepção de IFNγ ativa a Janus quinase 1, resultando na estimulação de sua associação com Sxn8 acima dos níveis constitutivos padrão. A ligação entre estas duas proteínas dentro do JAK1 complexo -SNX8 permite JAK1 para catalisar de SNX8 tirosinas fosforilação nas posições 95 e 126. Esta fosforilação ativa o JAK1 -SNX, e o SNX8 atua como um adaptador ou proteína de suporte, permitindo o recrutamento do inibidor da subunidade beta do fator nuclear kappa-B quinase (IKKβ) para JAK1 no complexo JAK1 -SNX8- IKKβ. Esta ligação é essencial para a ativação de IKKβ por meio de autofosforilação na serina na posição 177 (como SNX8 não tem atividade enzimática) e posterior dimerização e oligomerização.
Regulação do colesterol