Звёздная активность — явление снижения или изменения специфичности эндонуклеаз рестрикции, ведущее к неизбирательному разрезанию (рестрикции) ДНК при осуществлении реакции in vitro. Звёздная активность возникает в условиях отличных от оптимума для данного фермента. В результате звёздной активности происходит рестрикция в неканонических сайтах, иногда происходит полная потеря специфичности.
Причинами звёздной активности могут быть: низкая ионная сила буферного раствора, высокий рН, высокая концентрация глицерина (> 5% v/v), присутствие диметилсульфоксида (ДМСО), наличие Mg2+ (в случае эндонуклеазы HindIII) и др. Высокая концентрация глицерина имеет особенно важное значение в лабораторной практике, поскольку коммерчески доступные эндонуклеазы рестрикции обычно поставляются в буфере, содержащем значительное количество глицерина (50% v/v). Поэтому недостаточное разбавление раствора фермента может привести к звездной активности.
Внешние ссылки Star Activity - New England Biolabs Star Activity (Relaxation of Specificity) - Fermentas Star activity of restriction enzymes - подробный список звёздных активностей от TaKaRa
Ссылки
Категория:ДНК Категория:Гидролазы Категория:Генетическая инженерия Категория:Методы молекулярной биологии