W ramach linii obrony wyróżnia się następujące pozycje: Defensive tackles (DT) – zawodnik lub zawodnicy ustawieni w środku linii obrony, których zadaniem jest wkroczenie w formację przeciwnika, zakłócenie lub zatrzymanie akcji ofensywnej w polu przeciwnika lub też powstrzymanie ataku przed zdobyciem jardów, Defensive ends (DE) – zawodnicy ustawieni na zewnątrz linii obrony, których zadaniem jest przedarcie się za linie ataku przeciwnika i wywarcie presji na rozgrywającego lub powalenie go (sack),
Linebacker (LB) – zawodnicy, którzy ustawieni są od trzech do pięciu jardów za linią obrony. Ich ilość i rozstawienie zależy od układu linii obrony. Zadaniem wspomagających jest pomoc linii obrony w zatrzymaniu biegaczy przeciwnika, szarżowanie rozgrywającego lub krycie potencjalnych skrzydłowych drużyny ataku. Zawodnicy ci są liderami formacji defensywnej, koordynując z trenerem formacje i zagrywki w obronie. Zawodników tych dzieli się na następujące, wyspecjalizowane pozycje: Middle linebacker (MLB) – ustawiony zaraz za linią obrony, to najczęściej ten zawodnik koordynuje z trenerem zagrania obronne.