3 września udał się w rejs na swój pierwszy wojenny patrol, kierując się na Atlantyk. W dniach 12–22 września okręt wchodził w skład wilczego stada . 15 września U-Boot wykrył płynący na północ konwój ON-129, naprowadzając na niego pozostałe okręty stada. Od 22 do 26 września U-221 został przyporządkowany do stada , a następnie (między 26 a 30 września).
5 października U-Boot otrzymał rozkaz dołączenia do stada „Wotan”. 13 października o godzinie 5:56 około 500 Mm na wschód od Cieśniny Belle Isle U-221 trafił jedną torpedą zbudowany w 1921 roku norweski parowiec „Fagersten” o pojemności 2342 BRT, płynący w konwoju na trasie Providence – Nowy Jork – Liverpool z ładunkiem drewna i stali. Statek trafiony za kominem zatonął w ciągu 10 minut na pozycji , a z liczącej 29 osób załogi zginął kapitan Sverre Langfeldt i 18 marynarzy;