prawdopodobnie była Angielką.
Michelangelo Florio pracował następnie jako nauczyciel Jane Grey oraz w rodzinie Williama Herberta, 1. hrabiego Pembroke, ojca Henry'ego Herberta, 2. hrabiego Pembroke. Zadedykował on Jane Grey i Henry'emu, swoim najlepszym uczniom, książkę Regole de la lingua thoscana. Michelangelo Florio był prawdopodobnie świadkiem wielu wydarzeń z życia Lady Jane Grey, jak również opowiadał jej o prześladowaniach, których doświadczył we Włoszech.
Emigracja Według siedemnastowiecznego antykwariusza Anthony'ego Wooda, rodzina Florio razem z młodym Johnem opuściła Anglię wraz z wstąpieniem na tron królewski Marii I Tudor. Osiedlili się w protestanckim Bergell w Szwajcarii, gdzie Michelangelo Florio dostał posadę pastora. Jonh Florio porozumiewał się z ojcem w języku włoskim, a z matką prawdopodobnie po angielsku. Ponadto ojciec uczył go francuskiego i niemieckiego. W wieku siedmiu lat John Florio został posłany do Tybingi w Niemczech, gdzie miał mieszkać i pobierać nauki od protestanckiego teologa Piera Paolo Vergerio, a później kontynuować naukę na uniwersytecie w Niemczech. John wrócił do Anglii, prawdopodobnie razem z matką, za rządów królowej Elżbiety I, we wczesnych latach 70. XVI wieku.