La réaction d'amplification enzymatique de coupure (en anglais, nicking enzyme amplification reaction, NEAR) est une méthode d'amplification in vitro de l'ADN comme la réaction en chaîne par polymérase (PCR). La NEAR est isotherme, c'est-à-dire qu'elle réplique l'ADN à une température constante en utilisant une polymérase (et une enzyme de coupure) pour amplifier l'ADN de manière exponentielle à une température comprise entre et .
L'un des inconvénients de la PCR est qu'elle prend du temps pour dérouler l'ADN double brin en brins simples à l'aide de la chaleur (un processus appelé dénaturation). Cela conduit à des temps d'amplification typiquement de trente minutes ou plus pour une production significative de produits amplifiés.
Les avantages potentiels de la NEAR par rapport à la PCR sont une vitesse accrue et des besoins énergétiques moindres, caractéristiques partagées avec d'autres schémas d'amplification isothermesBiosensors 2013, 3, 18-43; doi:10.3390/bios3010018. Un inconvénient majeur de la réaction NEAR par rapport à la PCR est que la production de produits d'amplification non spécifiques est un problème courant avec les réactions d'amplification isothermeBiochemistry. 2008 Sep 23;47(38):9987-99. doi: 10.1021/bi800746p..
La réaction NEAR utilise des endonucléases naturelles ou modifiées qui introduisent une rupture de brin sur un seul brin d'un site de clivage d'ADN double brin. La capacité de plusieurs de ces enzymes à catalyser l'amplification isotherme de l'ADN a été divulguée mais non revendiquée dans les brevets délivrés pour les enzymes elles-mêmesUS Patent 6,660,475. December 9, 2003.
Notes et références
Articles connexes Réaction en chaîne par polymérase Techniques de biologie moléculaire Liste d'abréviations de biologie cellulaire et moléculaire Téléportation de l'ADN PCR in silico PCR par essais Maladie à coronavirus 2019 alias Covid-19
* Catégorie:Biologie moléculaire Catégorie:Technique de laboratoire