Biografia Nato e cresciuto a Roma, con origini metà pugliesi e metà siciliane. Diplomato nel 1992 all'Accademia nazionale d'arte drammatica Silvio d'Amico, esordisce in teatro nel 1993 con l'Elettra diretta da Massimo Castri, che lo dirigerà negli anni successivi nella Trilogia della villeggiatura di Carlo Goldoni. Al cinema esordisce nel 1996 con la commedia La bruttina stagionata, regia di Anna Di Francisca. Collabora successivamente con la compagnia greca diretta da Theodoros Terzopoulos e con i registi Giancarlo Sepe e Valter Malosti. È ideatore e interprete di numerosi spettacoli, fra i quali I kiss your hands, catalogo semiserio delle lettere di Mozart, Non fate troppi pettegolezzi, Le sante corde dei canti, Attilio Bertolucci e Pier Paolo Pasolini, un'amicizia in versi. Tra il 2004 e il 2010 realizza con Giuseppe Bertolucci il pluripremiato progetto Gadda e Pasolini, antibiografia di una nazione (edito anche da Minimum Fax) comprendente i due spettacoli 'Na specie de cadavere lunghissimo (Premio Istryo e Golde graal nel 2005) e L'ingegner Gadda va alla guerra o della tragica istoria di Amleto Pirobutirro (Premio Ubu 2010 al miglior spettacolo dell'anno e al miglior attore dell'anno, Premio della critica e Premio maschere d'oro del teatro).
Nel 2012 registra integralmente la lettura del capolavoro di Gadda Quer pasticciaccio brutto de via Merulana (Emons Audiolibri). Nel 2014, sempre per Emons, registra la lettura integrale di Ragazzi di vita di Pasolini. Nel 2014 è in scena con Lo Straniero, un'intervista impossibile, tratto dal romanzo L'Étranger di Albert Camus e, l'anno seguente, con il reading-spettacolo Ragazzi di vita. Ancora nel 2015 è fra i protagonisti di Lehman Trilogy di Stefano Massini, ultima regia di Luca Ronconi per il Piccolo Teatro di Milano. Nel 2016 vince il premio Le Maschere del teatro italiano come miglior attore in un monologo (Lo Straniero di Camus). Nella stagione 2017/2018 è il protagonista dello spettacolo Freud o dell’interpretazione dei sogni prodotto dal Piccolo Teatro di Milano, su testo di Stefano Massini per la regia di Federico Tiezzi. Fra i suoi ultimi lavori per il teatro, Con il vostro irridente silenzio, studio sulle lettere dalla prigionia e sul Memoriale di Aldo Moro, di cui cura anche la regia e la drammaturgia.
Fra i suoi lavori per il cinema e la televisione si ricordano: Vite in sospeso, regia di Marco Turco, Così ridevano, regia di Gianni Amelio (Leone d'oro al Festival di Venezia nel 1998), Un amore e Qui non è il paradiso, entrambi diretti da Gianluca Maria Tavarelli, L'amore probabilmente, regia di Giuseppe Bertolucci, Il partigiano Johnny di Guido Chiesa, Hannibal di Ridley Scott, Sole negli occhi e Il dolce e l'amaro, diretti da Andrea Porporati, La meglio gioventù (vincitore del premio Un Certain Regard al Festival di Cannes nel 2003) e Romanzo di una strage per la regia di Marco Tullio Giordana, L'inverno di Nina Di Majo, De Gasperi - L'uomo della speranza di Liliana Cavani, Musikanten di Franco Battiato, La ragazza del lago di Andrea Molaioli, Signorina Effe di Wilma Labate, Galantuomini di Edoardo Winspeare, Paolo VI - Il papa nella tempesta, miniserie diretta da Fabrizio Costa, Beket di Davide Manuli.
Nel 2010 interpreta il ruolo dello psichiatra Franco Basaglia nella miniserie televisiva C'era una volta la città dei matti..., diretta da Marco Turco e sempre nello stesso anno prende parte a L'amore buio di Antonio Capuano. Tra il 2011 e il 2012 prende parte ai film La kryptonite nella borsa di Ivan Cotroneo, La leggenda di Kaspar Hauser con Vincent Gallo, regia di Davide Manuli. Nel 2014 interpreta il ruolo dell'uomo d'affari Giovanni Bernaschi ne Il capitale umano di Paolo Virzì, per il quale ottiene tutti i principali riconoscimenti della stagione: David di Donatello, Nastro d'Argento e Premio Gassman al Bari film festival. Nello stesso anno è protagonista della seconda commedia di Francesco Bruni, Noi 4, per la quale è premiato al Festival di Annecy per la migliore interpretazione maschile. Nel 2015 è fra gli interpreti di Fai bei sogni di Marco Bellocchio.
Dal 2017, assieme a Natalia Di Iorio, cura la stagione teatrale PrimaVera al Garibaldi a Lucera, città a cui è legato per le origini del nonno Gianbattista Gifuni, storico bibliotecario della Biblioteca Comunale 'R. Bonghi'. La stagione teatrale, che si svolge annualmente in primavera presso il Teatro Garibaldi di Lucera, è inoltre inserita nella rassegna culturale Estate|Muse|Stelle, che ha luogo annualmente in estate presso l'Anfiteatro romano di Lucera.
Nel 2018 interpreta il ruolo del giornalista Pippo Fava nel film per la televisione Prima che la notte, diretto da Daniele Vicari. Nel 2020 è il protagonista del film La belva di Ludovico Di Martino, prodotto da Matteo Rovere e dalla Warner. Nel 2022 torna ad interpretare Aldo Moro stavolta nel film Esterno notte di Marco Bellocchio, ruolo grazie al quale vince tutti i principali riconoscimenti della stagione fra cui il David di Donatello e il Nastro d'Argento Grandi Serie come miglior attore protagonista. Nel 2023 torna a lavorare con Marco Bellocchio nel film Rapito.
Nel 2024 è protagonista del film di Francesca Comencini Il tempo che ci vuole, presentato fuori concorso all'81ª Mostra internazionale d'arte cinematografica di Venezia.
A febbraio 2026 esce su HBO Max la miniserie Portobello, che lo vede protagonista nei panni di Enzo Tortora, e che segna una nuova collaborazione col regista Marco Bellocchio.
Vita privata È figlio di Gaetano Gifuni, segretario generale della Presidenza della Repubblica sotto i settennati di Oscar Luigi Scalfaro e Carlo Azeglio Ciampi. È sposato dal 2000 con l'attrice milanese Sonia Bergamasco, con la quale ha recitato in diversi film, tra cui La meglio gioventù e la miniserie televisiva De Gasperi - L'uomo della speranza, e con la quale ha avuto due figlie. È tifoso della .
Filmografia Cinema Giovanni Falcone, regia di Giuseppe Ferrara (1993) La bruttina stagionata, regia di Anna Di Francisca (1996) Vite in sospeso, regia di Marco Turco (1998) Così ridevano, regia di Gianni Amelio (1998) La carbonara, regia di Luigi Magni (1999) Un amore, regia di Gianluca Maria Tavarelli (1999) Qui non è il paradiso, regia di Gianluca Maria Tavarelli (2000) L'amore probabilmente, regia di Giuseppe Bertolucci (2000) Il partigiano Johnny, regia di Guido Chiesa (2000) L'inverno, regia di Nina Di Majo (2001) Hannibal, regia di Ridley Scott (2001) Sole negli occhi, regia di Andrea Porporati (2001) La meglio gioventù, regia di Marco Tullio Giordana (2003) Movimenti, regia di Claudio Fausti e Serafino Murri (2004) Musikanten, regia di Franco Battiato (2005) Fratelli di sangue, regia di David Sordella (2006) La ragazza del lago, regia di Andrea Molaioli (2007) Signorina Effe, regia di Wilma Labate (2007) Il dolce e l'amaro, regia di Andrea Porporati (2007) Beket, regia di Davide Manuli (2008) Galantuomini, regia di Edoardo Winspeare (2008) L'amore buio, regia di Antonio Capuano (2009) L'uomo nero, regia di Sergio Rubini (2009) Io sono con te, regia di Guido Chiesa (2010) La kryptonite nella borsa, regia di Ivan Cotroneo (2011) Romanzo di una strage, regia di Marco Tullio Giordana (2011) La leggenda di Kaspar Hauser, regia di Davide Manuli (2012) Il capitale umano, regia di Paolo Virzì (2014) Noi 4, regia di Francesco Bruni (2014) Fai bei sogni, regia di Marco Bellocchio (2016) Rubando bellezza, regia di Fulvio Wetzl, Danny Biancardi e Laura Bagnoli – documentario (2016) Dove non ho mai abitato, regia di Paolo Franchi (2017) La belva, regia di Ludovico Di Martino (2020) Lei mi parla ancora, regia di Pupi Avati (2021) La scuola cattolica, regia di Stefano Mordini (2021) Esterno notte, regia di Marco Bellocchio (2022) I viaggiatori, regia di Ludovico Di Martino (2022) Mixed by Erry, regia di Sydney Sibilia (2023) Rapito, regia di Marco Bellocchio (2023) Il tempo che ci vuole, regia di Francesca Comencini (2024) Volontè - L'uomo dai mille volti, regia di Francesco Zippel (2024) Duse, The Greatest, regia di Sonia Bergamasco – documentario (2024)
Televisione Le cinque giornate di Milano, regia di Carlo Lizzani – miniserie TV (2004) De Gasperi - L'uomo della speranza, regia di Liliana Cavani – miniserie TV (2005) L'ultima frontiera, regia di Franco Bernini – miniserie TV (2006) Paolo VI - Il papa nella tempesta, regia di Fabrizio Costa – miniserie TV (2008) C'era una volta la città dei matti..., regia di Marco Turco – miniserie TV (2010) Prima che la notte, regia di Daniele Vicari – film TV (2018) Boris 4 – serie TV, episodio 8 (2022) L'amica geniale – serie TV, 10 episodi (2024) Portobello, regia di Marco Bellocchio – miniserie TV (2026)
Teatro Elettra di Euripide, regia di Massimo Castri (1993-1994) Macbeth di William Shakespeare, regia di Giancarlo Sepe (1994) Le smanie per la villeggiatura di Carlo Goldoni, regia di Massimo Castri (1995-1996) Antigone di Sofocle, regia di Theodoros Terzopoulos (1995, 1997) Le avventure della villeggiatura di Carlo Goldoni, regia di Massimo Castri (1996-1997) Il ritorno dalla villeggiatura di Carlo Goldoni, regia di Massimo Castri (1996-1997) ¿Pia? di Marguerite Yourcenar, regia di Valter Malosti (2004) 'Na specie de cadavere lunghissimo da Pier Paolo Pasolini e Giorgio Somalvico, regia di Giuseppe Bertolucci (2004-2007, 2010-2011, 2013-2015) I Kiss Your Hands - catalogo semiserio delle lettere mozartiane, regia di Fabrizio Gifuni e Sonia Bergamasco (2006-2008) Non fate troppi pettegolezzi (omaggio a Cesare Pavese), regia di Fabrizio Gifuni (2008, 2010) L'ingegner Gadda va alla guerra o della tragica istoria di Amleto Pirobutirro, da Carlo Emilio Gadda e William Shakespeare, regia di Giuseppe Bertolucci (2010-2012, 2015) Attilio Bertolucci e Pier Paolo Pasolini, un'amicizia in versi, da Attilio Bertolucci e Pier Paolo Pasolini, regia di Fabrizio Gifuni e Sonia Bergamasco (2011, 2013) Il Piccolo Principe in concerto, da Antoine de Saint-Exupéry, regia di Fabrizio Gifuni e Sonia Bergamasco (2011-2013) Gli indifferenti. Parole e musiche da un Ventennio, a cura di Fabrizio Gifuni (2012-2013) Lo straniero, un'intervista impossibile, da Albert Camus, regia di Roberta Lena (2013-2016) Concerto per Amleto, scritto, diretto e interpretato da Fabrizio Gifuni (2013, 2016-2018) Un certo Julio. Omaggio a Julio Cortázar e Roberto Bolaño, da Julio Cortázar e Roberto Bolaño, a cura di Fabrizio Gifuni (2014, 2016-2017, 2019, 2024) Ragazzi di vita, da Pier Paolo Pasolini, a cura di Fabrizio Gifuni (2014-2017) Lehman Trilogy di Stefano Massini, regia di Luca Ronconi (2015-2017) Il dio di Roserio, studio sul primo capitolo di Alfredo Testori, a cura di Fabrizio Gifuni (2015-2017) Freud o l'interpretazione dei sogni di Stefano Massini, riduzione e adattamento di Federico Tiezzi e Fabrizio Sinisi, regia Federico Tiezzi (2018) Fatalità della rima. Omaggio a Giorgio Caproni, ideazione, drammaturgia e interpretazione di Fabrizio Gifuni (2018-2020, 2022, 2024) Con il vostro irridente silenzio. Studio sulle lettere dalla prigionia e sul memoriale di Aldo Moro, ideazione, drammaturgia e interpretazione di Fabrizio Gifuni (2018-2026) Il male dei ricci - Ragazzi di vita e altre visioni, da Pier Paolo Pasolini, ideazione di Fabrizio Gifuni (2022-2026) Il paradigma amletico nelle ultime lezioni di Orazio Costa, ideazione di Fabrizio Gifuni (2026)
Doppiaggio Fabrizio Gifuni si è cimentato occasionalmente anche come doppiatore: ha infatti prestato la voce a Ivan Franek nel film del 2003 Brucio nel vento di Silvio Soldini e a Willem Dafoe nel ruolo di Pier Paolo Pasolini nel film Pasolini del 2014 diretto da Abel Ferrara.
Audiolibri Quer pasticciaccio brutto de via Merulana, di Carlo Emilio Gadda, Emons Audiolibri, 2012 Ragazzi di vita di Pier Paolo Pasolini, Emons Audiolibri, 2014 Notturno cileno di Roberto Bolaño, Emons Audiolibri, 2017