Плі́вка-пі́дкладка () — тонка плівка з пластмаси або вуглецю, що наноситься на сітку для підтримки зразка, розміщеного над неюViswanathan P. Electron microscopy. — Chennai : MJP Publisher, 2011. — 532 p.. Сітка () — це металеві диски, на яких розміщуються зразки для трансмісійної електронної мікроскопії (ТЕМ). Найчастіше сітки виготовляють з міді, але також використовують сітки з інших металів, таких як золото, нікель, платина або сплави, як платина-паладій тощо. Тільки ці сітки можуть бути вставлені в камеру для зразка електронного мікроскопа (ЕМ).
Типи плівок-підкладок Пластмасові плівки-підкладки Пластмасові плівки-підкладки розкладаються електронним пучком і мають тенденцію до дрейфу протягом перших секунд опромінення. Проте, зазвичай вони забезпечують достатню стабілізацію для ультратонких зрізів зразків, залитих смолами. Загалом, пластмасові плівки не підходять для візуалізації зразків, що потребують високої роздільної здатності. Навіть формварові та з вуглецевим покриттям (вуглецеве покриття стабілізує структуру пластмасових плівок). Формвар є найбільш широко використовуваним матеріалом для виготовлення плівок-підкладок для трансмісійної електронної мікроскопії, інші численні пластмасові матеріали підходять, особливо коли фізичні властивості плівки-підкладки (а отже, взаємодія між плівкою-підкладкою та зразком) повинні змінюватись. Ці плівки базуються на, наприклад, колодії (розчинник: ізоамілацетат), ацетилцелюлозі (розчинник: ацетон, етилацетат), метилметакрилаті (розчинник: хлороформ) або полістирені (розчинник: бензен).
Вуглецеві та пластмасові плівки-підкладки з вуглецевим покриттям Для виготовлення плівок-підкладок, які безпосередньо адсорбують дрібні зразки, такі як білкові молекули, найчастіше використовують вуглець. Вуглець може випаровуватися in vacuo з утворенням рівномірної аморфної плівки. Для цього необхідна наявність вакуумного випарника (). Пластмасові плівки-підкладки з вуглецевим покриттям () та вуглецеві плівки-підкладки () отримують шляхом випаровування і подальшої сублімації вуглецю на пластмасові плівки-підкладки на сітках або на свіжосколену слюду як проміжний носій (для отримання власне вуглецевих плівок-підкладок).
Застосування у біологічних дослідженнях Плівки-підкладки слід використовувати лише за крайньої потреби. Ультратонкі зрізи зразків, залитих епоксидними та поліефірними смолами досить міцні, без будь-якої плівки-підкладки, щоб протистояти бомбардуванню електронами. Отже, слід використовувати не покриті сітки (300-400 меш/дюйм) для зрізів зразків, залитих цими смолами, для досягнення контрастності й роздільної здатності та уникнення забруднення. Зрізи щільно прилягають до сіток без підкладок, якщо вони встановлюються на матовій поверхні сітки, сполосканій в ацетоні перед використаннямHAYAT, M. A. (1986). Support Films. Basic Techniques for Transmission Electron Microscopy, 265–284. doi:10.1016/b978-0-12-333926-3.50009-9. В нижченаведеній таблиці показано особливості застосування плівок-підкладок в біологічних дослідженнях. Сітки та плівки-підкладки для препарування різних зразківHoppert M. Microscopic Techniques in Biotechnology. — Weinheim: Wiley-VCH, 2003. — 343 p.ЗразокПлівка-підкладкаПрепарування/характеристики зразкаСпецифікація сіткиБілкові молекули, субклітинні структури, поодинокі клітиниВуглецева плівка (дуже тонкі вуглецеві плівки потрібно підтримувати перфорованою пластиковою плівкою)Негативне фарбування, однонапрямне відтінення металомМаленькі чотирикутні або шестикутні вічка (700-300 меш/дюйм), міднаПерфорована вуглецева (з гідрофільною поверхнею)Заморожені гідратовані зразкиМаленькі чотирикутні або шестикутні вічка (700-300 меш/дюйм), міднаОдноклітинна тканина, клітинні агрегатиФормварУльтратонкі зрізи зразків, залитих смолами (товщиною 70-80 нм)— маленькі зразки (наприклад, поодинокі бактеріальні клітини)— великі зразки (наприклад, великі агрегати або тканинні зразки)— стрічка серійних зрізів— подальша обробка (наприклад, імуноцитохімічна локалізація)чотирикутні/шестикутні вічка (400 меш/дюйм), мідна100-300 меш/дюйм, міднаоднослотові (), багатослотові (), міднаНікелеваБез плівки-підкладкиДуже тонкі зрізи (товщиною 40-50 нм) для елементарного аналізуМаленькі чотирикутні або шестикутні вічка (700-400 меш/дюйм), міднаФормвар, покритий вуглецем ФормварКріозрізиЧотирикутні або шестикутні вічка (400 меш/дюйм), міднаВеликі зразки з малими досліджуваними ділянкамиБез плівки-підкладкиЗразки для сканувальної електронної мікроскопії (СЕМ)Шукальні сітки різної форми та розміру
Посилання